生物基因工程问题

高二生物基因工程的几个问题~

1 目的基因是你自己研究的那个基因，是你人为添加到质粒上的基因。
标记基因是质粒上原本就存在的基因，一般是抗性基因。
在克隆的时候，你怎么判定哪些质粒是转化成功进入细胞了的呢？也就是“组DNA的鉴定和选择”的过程。而标记基因就是标记出连接转化成功了的克隆。如果标记基因，比如抗性基因表达了，那么就会在抗性培养基上长出菌落来。这样也从侧面说明了，你的目的基因很可能也克隆成功了。
2 首先你要弄清楚质粒的定义，它同样是一中可以独立存在在细胞中独立复制的环状DNA，独立于细胞基因组DNA。一般基因工程中，构建成功的质粒导入到细胞中，不需要整合到体细胞基因组中，就可以完成复制或者表达目的基因的功能。
但是，也有特殊情况下，需要通过同源重组将目的基因整合到细胞基因组DNA中的，这种视实验需要而定。
3 整合，一般是通过同源重组的途径，将你的目的基因插入或者替换到体细胞基因组DNA中。这样就可以随着细胞的分裂完成复制，或者随着细胞某些基因的表达调控使得目的基因得到表达和调控。相当于就是使得你原本外来的目的基因称为体细胞的整体的一部分了。

这位朋友，对于第一个问题，你首先得清楚什么是CDNA，cDNA是由mRNA通过逆转而得到的DNA片段。它和基因组DNA是有区别的，区别在于少了转录时被剪切掉了部分内含子之类的片段。所以在转基因的时候我们一般选择扩增CDNA片段，因为它是转录前被加工过的，去掉了许多不必要的片段，获得基因的关键部分。那么你酶切获得的DNA片段实际上是未加工过的，含有许多内含子，增强子等片段，并且你用酶切来获得的片段在酶切位置的精确性和单一性上是很难控制的。而通过逆转录PCR你直接就可准确得获得此基因的完整并且浓度很高的片段。

对于第二个问题在构建表达载体的时候一般都需要具有启动子和终止子，所以我觉得你的说法是正确的。

13.题目的意思是：环状的是质粒，线状的是目的基因。
（1）要把目的基因切下来，就得两端都切一下，用“酶II"
切质粒的时候，如果用酶II之后连接进去，目的基因可能会连进多个位点。而且还会出现一大堆复杂的现象，这个先不说。所以切质粒只能用"酶I"
（2）要插入载体，自然要用到“连接酶”了
（3）标记基因的作用就是“便于筛选”
（4）结构基础是“黏性末端”。但是没有黏性末端也能拼接，我不知道高中的大纲教了那些东西。
（5）为什么大肠杆菌不能而酵母能呢？是因为大肠杆菌是原核生物而酵母是真核生物。真核生物在合成蛋白质方面较之原核生物，区别在哪？“酵母是真核生物，和哺乳类细胞一样，具有细胞核和内质网、核糖体、高尔基体等细胞器，能对合成的蛋白进行一系列修饰。”大概是这样的，表述什么的依据你们高中课本。
15.甲是质粒乙是基因。
甲有一个酶切位点，乙有两个。。和13题是一样的。。

你这问题好多……
我来看看。
质粒一般来说，都是环状的，而且质粒中可能有好几个基因（基因就是一小段DNA,可以在质粒上，也可以在基因组上）。
1. 质粒上酶的选择：由于酶I与酶II的序列有重叠，如果选择酶II，则质粒两个基因均被切开，这样不行，所以要选择酶I。
目的基因上酶的选择：由于我们需要把目的基因切下来，所以基因的两端均需要用酶，这样的话，根据题目，就需要酶I与酶II共同作用，要选择两种酶。

2. 要想使基因连为一体，还需要连接酶的作用
3. 质粒上标记基因是什么作用呢？当我们构建好重组质粒，并把质粒转化到宿主菌以后，如何认定质粒被成功地转化？或者如何认定重组质粒的构建没有问题？即通过标记基因。后者可能会产生某种颜色反应，或对某种特定的抗生素有抗性。
4. 结构基础是不同生物的遗传物质均为DNA，且均是由A、T、G、C四种碱基构成的，密码子具有通用性。

5. 酵母的好处：首先酵母是一种真核细胞，可以表达结构复杂的真核生物蛋白；其次，酵母是一种单细胞生物，培养简单，生长迅速。

15题
甲是质粒，乙是目的基因。
在序列中寻找酶切位点发现，甲分子中只有一个；而乙分子中有两个。甲被切开后，形成了一个开环的DNA分子；而乙被切开后，形成了三个片段，那么很显然，其中一个就是目的基因。

好久没看过高中生物书了。所以可能回答中有些不是很准确，仅供参考。

13、（1）（目的基因题中已有竖条表示了的部分，质粒一般是个圆环[也就上面的那个]——它是一种环状DNA分子）质粒应用限酶I切割，目的基因片断得用酶II切割；
加入适量的酶（DNA连接酶）等；
有标记基因的作用是以便对重组质粒进行筛选（或鉴别目的基因是否导入受体细胞）；
（2）生物界的遗传共性，遗传物质DNA分子的组成相同，都是由两条脱氧核苷酸链构成的双螺旋结构；
（3）大肠杆菌为原核生物，胞内无核膜及高等生物所具有的复杂胞器，而酵母菌为真核生物，胞内有真核及有膜的细胞器。
15、（1）乙含目的基因，用EcoRi切可找到两个切口；反之，甲为质粒，只一个切口。

首先，质粒本身是圆的，切开后，要连接切好的具有合适位点的目的基因。
第一小题①重要的是，分别对 质粒 和 目的基因所在DNA 切出可以使两者结合的末端。注意要结合成为完整的重组质粒，也就是新的圆形。观察给出的识别序列，都具有GATC，果断都用切“—'GATC-”的酶II。第一题两空都填限制酶II。
②，DNA连接酶。。。这个不需要解释吧我觉得，，
③，筛选作用，把没有连上目的基因就自己连成圆形的质粒筛掉。此题不够严谨，图应该给出标记基因的位置。标记基因一般为抗生素抗性基因，重组后在含抗生素培养基里培养，没标记基因（抗性基因）的会死亡。填筛选作用应该就给分了。
第二小题，碱基互补配对。记住。这个空常考。
第三小题，酵母菌既能表达结构复杂蛋白质，又操作简单，表达水平高。

十五题，有一个切口的是质粒，两个切口的是目的基因。观察下，有两个酶切位点GAATTC的是目的基因————即乙DNA分子。有一个GAATTC的是质粒————即甲DNA分子。

是因为世界上所有的生物共用一套密码子表，所有的遗传物质都可以通过这一套密码子表转录、逆转录或翻译所需要的物质

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