高二生物基因工程的几个问题

高二生物基因工程的问题 限制酶特点 只能识别GAATTC序列~

GAATTC是限制性内切酶ECORⅠ在DNA中识别的位点，识别后从GA之间切段。限制性内切酶有很多种，每种都有可以识别的片段，ECORⅠ只是比较常见的一种而已。最后一个图显然X酶识别的是TTCGT---序列，不能按你想的那么说，你就记得一种限制性酶对应一种功能，一种或两种序列就行，是专一的。其余多数酶都不识别GAATTC。

据图分析可知抗病基因与载体质粒共有酶切位Pst1.Sma1.EcoR1.但Sma1切割位点在抗病基因(目的基因)上，用其切割会破坏抗病基因的结构而影响其功能，所以只能用限制Pst1.EcoR1对抗病基因和质粒进行切割。

1 目的基因是你自己研究的那个基因，是你人为添加到质粒上的基因。
标记基因是质粒上原本就存在的基因，一般是抗性基因。
在克隆的时候，你怎么判定哪些质粒是转化成功进入细胞了的呢？也就是“组DNA的鉴定和选择”的过程。而标记基因就是标记出连接转化成功了的克隆。如果标记基因，比如抗性基因表达了，那么就会在抗性培养基上长出菌落来。这样也从侧面说明了，你的目的基因很可能也克隆成功了。
2 首先你要弄清楚质粒的定义，它同样是一中可以独立存在在细胞中独立复制的环状DNA，独立于细胞基因组DNA。一般基因工程中，构建成功的质粒导入到细胞中，不需要整合到体细胞基因组中，就可以完成复制或者表达目的基因的功能。
但是，也有特殊情况下，需要通过同源重组将目的基因整合到细胞基因组DNA中的，这种视实验需要而定。
3 整合，一般是通过同源重组的途径，将你的目的基因插入或者替换到体细胞基因组DNA中。这样就可以随着细胞的分裂完成复制，或者随着细胞某些基因的表达调控使得目的基因得到表达和调控。相当于就是使得你原本外来的目的基因称为体细胞的整体的一部分了。

1靶基因，基因研究自己，你加入人类基因的质粒。
标记基因是原先就存在的质粒中的基因，一般的抗性基因。

在克隆的时候，怎么你确定该质粒转化成功进入细胞？也就是说，识别和选择过程中的基因组DNA。转型成功克隆标记基因标记的连接。如果标记基因，如抗性基因的表达，将长出菌落耐介质。这也从侧面看你的目标基因可能是成功的克隆。

2首先你要弄清楚的质粒的定义，它是独立的复制在细胞中的一个独立的细胞基因组DNA的环状DNA，可以独立存在。普通遗传工程和建立成功的质粒被导入到细胞中，并且不需要融入的体细胞基因组，复制或表达的靶基因功能就可以完成。

但是，有一些特殊的情况下，通过同源重组整合入基因组DNA的细胞，如实验的需求可能是与靶基因。
3一体化，通常由同源重组途径，所需基因插入或取代的成体细胞的基因组DNA。这是可以做到的细胞分裂复制，或与细胞的某些基因的表达和调控的靶基因的表达和调控。相当于最初被称为体的总体外交目标基因的一部分。

1.将目的基因用基因标记技术标记就成了标记基因了。重组DNA不一定含有目的基因，重组DNA与被标记的目的基因进行对比就能看出是否为含有目的基因。就能进行鉴定和选择。
2.整个质粒在细胞里边。目的基因插入质粒后就与质粒的DNA进行整合形成环状的DNA。
3.整合就是将新的DNA片段添加到原有的DNA中形成新的DNA。

因为有酶切位点，酶切位点互补就能整合

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