高中生物题,基因工程,急急急

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高中生物基因工程题,高手请进,急急急~

首先,第一问,DNA连接酶对两端序列没有专一性要求。DNA被切开,暴露的单链部分的碱基会根据碱基互补配对原则在DNA连接酶的督促下又联合成双联,这样就连一起了。
图中目标基因的X端和载体质粒的M端都是被ECORI酶切割后暴露的单链部分。当目标DNA片段镶嵌到质粒中时,X端与M端就配对成双连,这样就形成了完整的新的又能被ECORI酶切割的一段序列。再加上质粒本身就有没有被破坏的PSTI酶可以切割的序列。所以重组质粒有两个可以切的地方:EcoRⅠ酶对应序列、PstⅠ酶对应序列。
用EcoRⅠ和PstⅠ酶切时,两种酶都有对应可以切的序列。所以重组质粒被切两刀!得到两种产物!采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切,只有EcoRⅠ酶可以切的地方,没有SmaⅠ酶可以切的地方,所以重组质粒只被EcoRⅠ切了一刀,得到一种产物!

四环素基因应该是"抗四环素抗性基因",如果大肠杆菌质粒中有这种基因,那么它在四环素里就不会死.问题是你插入的目的基因是会使四环素基因表达还是使它失活.有可能你的目的基因会使四环素基因失活,这样的话不能正常生长的大肠杆菌才是有目的基因的.所以那个命题是错的.你的老师的解释也不对.

参考
在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体。人工构建的质粒可以集多种有用的特征于一体,如含多种单一酶切位点、抗生素耐药性等。常用的人工质粒运载体有pBR322、pSC101。pBR322含有抗四环素基因(Tcr)和抗氨苄青霉素基因(Apr),并含有5种内切酶的单一切点。如果将DNA片段插入EcoRI切点,不会影响两个抗生素基因的表达。但是如果将DNA片段插入到Hind III、Bam H I 或 Sal I切点,就会使抗四环素基因失活。这时,含有DNA插入片段的pBR322将使宿主细菌抗氨苄青霉素,但对四环素敏感。没有DNA插入片段的pBR322会使宿主细菌既抗氨苄青霉素又抗四环素,而没有pBR322质粒的细菌将对氨苄青霉素和四环素都敏感。

(1)

(2)

保证外源基因编码序列编码正确的氨基酸序列



(1)第三轮

(2)保证外源基因编码序列编码正确的氨基酸序列
解析:本题以克隆特定启动子为背景,考查基因工程操作及相关知识,结合图示弄清发明思路是关键。PCR过程中,需要根据模板DNA已知的碱基序列设计引物,但由于启动子部分不能被转录,最终体现在蛋白质分子的氨基酸序列中,导致启动子序列的克隆困难。人们可以根据组成蛋白质的肽链首、尾氨基酸序列推测基因编码序列的首、尾碱基序列,进而设计引物,科学家发明了将启动子序列置于克隆DNA片段中间、已知序列的基因编码序列位于两端的方法,实现对启动子的克隆,是该发明的主要思路。由于翻译过程中以“三联体”为阅读单位,为保证外源蛋白基因能够正常表达,保留在克隆启动子后的原基因片段(图中P)的碱基数必须是3的倍数,以保证转录形成的mRNA指导合成的蛋白质能够保留正常的氨基酸序列。


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