高中生物基因工程

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高中生物-基因工程~

我们正好做过双酶切,呵呵
是这样的,因为我们需要在切下来之后做连接,不能保持它一直都是一个“切口”的状态,如果载体你只切一个口,目的基因也切这么个口,那么连接的时候就混乱了,可能自身闭合,也可能连成长串

但是如果载体切两个不同的口,目的基因也切这么两个口,那么连接的时候就可以1对1的把目的基因和载体给连上来

同一目的基因不同酶切下来的时候,其实两端带了一些无关的碱基的(也可以理解成冗余部分,专门拿来切的。。。呵呵)
条件的话,就是两种酶的切点不能太近,至少要隔10来个碱基,实验起来双酶切可以同时做的(如果可以用同样的缓冲液),不然反复的酶切/跑胶/回收会让dna的含量降到无法继续实验……

一般基因在染色体上的位置是确定的,所以位置确定了,基本就知道是什么基因了
基因的转录产物mrna,可以通过逆转录获得目的基因
蛋白质的特性和蛋白质的氨基酸序列是相关的,知道氨基酸序列通过翻译的逆过程以及逆转录,可以获得目的基因

引物是一小段单链DNA或RNA,引物可以做为DNA复制开始时DNA聚合酶的结合位点,在细胞外的条件下,只有通过引物,DNA才可以开始进行复制。 引物是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与感兴趣区域一端的一条DNA模板链互补,另一个引物与感兴趣区域另一端的另一条DNA模板链互补。

引物是一小段单链DNA或RNA,引物可以做为DNA复制开始时DNA聚合酶的结合位点,在细胞外的条件下,只有通过引物,DNA才可以开始进行复制。 引物是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与感兴趣区域一端的一条DNA模板链互补,另一个引物与感兴趣区域另一端的另一条DNA模板链互补。

那么引物在合成过程中是否会减速,为什么
引物合成一般是不会有问题的,也可能会有问题,但是可能性较小,PCR的效率主要是看你的退火温度的选择,体系的组成,模板的质和量,而不是引物。不过如果引物选择不当,会降低扩增效果(引物:引物合成时,每一步反应效率都不能达到100%,产生碱基插入、缺失、置换突变的因素客观条件都有一直存在。引物链越长,突变的频率累加起来就越高。研究人员总希望合成的引物万无一失,这种心情可以理解。但是犹如PCR扩增,不可能绝对保证扩增产物中没有突变,引物合成也不可能保证100%正确。要知道,引物合成中发生错误(非人为因素)的频率,比任何高保真高温聚合酶PCR扩增过程所产生的频率都要高)

字打错了 是引物会减少吗
引物会减少,用于合成互补链的引物和合成的其他碱基一起构成了了互补链,剩余游离的引物会继续和后续互补的模板进行结合,再进行下一轮的扩增合成。但是,加入体系中的引物量是过量的,同样过量的还有dNTP,完全可以满足PCR多个循环的需求,不必担心引物减少后无法继续扩增的问题。


高中生物基因工程视频

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