流式检测细胞周期都有哪些染色方法
来自：车视 更新日期：早些时候
请教流式细胞术PI染色进行细胞周期分析的原理~
第二类另外加了一个步骤，在细胞培养液中加入核苷酸的模拟物，比如BrdU或者EdU。细胞新合成的DNA上就会有这些物质。在不同时间点收集细胞，用DNA染料染DNA的同时，还以用抗体或者化学发光法染核苷酸模拟物也发荧光。这个方法的有点就是不仅可以像第一类方法一样，看到处于细胞周期各个期的百分率，另外还可以看到有多少DNA是新合成的。是一个动态的过程。
流式检测细胞周期都有哪些染色方法视频
相关评论：13712622600：流式检测细胞周期都有哪些染色方法
于施威从分类上来说，一般有两类：第一类是只染DNA。这类方法比较简单，用酒精固定细胞后，直接加含有RNA酶的荧光染料，比如PI等，然后就可以直接上机。第二类另外加了一个步骤，在细胞培养液中加入核苷酸的模拟物，比如BrdU或者EdU。细胞新合成的DNA上就会有这些物质。在不同时间点收集细胞，用DNA染料染DNA的...
13712622600：细胞周期的流式细胞术为什么要用到rna酶
于施威这是因为做细胞周期的时候要用荧光染料染DNA，一次判断细胞DNA的相对含量。这些荧光染料，比如PI，可以染核酸，无法特异性的分别DNA和RNA。只有用RNA酶消化掉RNA后，才能消除RNA的干扰。不然DNA和RNA都会被染色。
13712622600：测细胞周期做流式前期一定要酒精固定吗
于施威测细胞周期就可以用PI单独染色，也可以用PI加上BrdU\/EdU。不论何种方法，都需要固定细胞。使用BrdU还要做细胞膜和核膜的通透，以利于抗体的进入。一般常见的，只用PI染色的方法，都是使用酒精固定。优点是快速。而BrdU的方法则可以使用多聚福尔马林。
13712622600：流式细胞周期结果 怎么分析
于施威这个是BrdU和7-AAD方法检测细胞周期。红色的gate就是G1期，绿色的就是S期，橙色的就是G2\/M期。BrdU, PI, 或者EdU方法和这个一样分析 如果单用PI等DNA染料染色，需要专业软件来分析计算了。比如这个图，是DNA染料单染，其中粉色部分是G1期，黄色部分是S期，绿色部分是G2\/M期。中间的分布一般是通过...
13712622600：流式细胞仪检测项目
于施威细胞内部钙离子浓度，直接加钙离子浓度荧光染料染色；细胞内部线粒体膜电位，比如JC-1，罗丹明染料；使用微球阵列，可以同时检测溶液中数十种可溶性蛋白的浓度。流式细胞仪的科研应用：主要有细胞动力学功能研究、环境微生物分析、流式细胞术与分子生物学研究。流式细胞仪检测方法 1、直接免疫荧光标记法 取...
13712622600：请教流式细胞术PI染色进行细胞周期分析的原理
于施威得到该细胞的光散射和荧光指标，分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。细胞内的DNA含量随细胞周期进程发生周期性变化，如G0\/G1期的DNA含量为2C，而G2期的DNA含量是4C。利用PI标记的方法，通过流式细胞仪对细胞内DNA的相对含量进行测定，可分析细胞周期各时相的百分比。
13712622600：流式细胞仪检测细胞周期DNA含量结果图怎样分析和说明
于施威如果只是PI的话，见图1。如果用Annexin V-FITC和碘化丙啶染色的话，正常的活细胞不被Annexin V-FITC和碘化丙啶染色(图2左下角)；凋亡早期的细胞仅被Annexin V-FITC染色，碘化丙啶染色呈阴性(图2右下角)；坏死细胞和凋亡晚期的细胞可以同时被Annexin V-FITC和碘化丙啶染色(图2右上角)。
13712622600：流式细胞仪测定细胞周期各时相的原理和基本步骤(不用说具体使用的量...
于施威再加入PI对DNA染色。在二维坐标图上，横坐标设为线性PI荧光强度，纵坐标设为模拟核苷酸的荧光强度（log）。典型的图就像下面一样：G1, G2 和S期就按照图中的划分来做。G1期的细胞没有新合成DNA，所以BrdU信号是阴性，而PI的信号位于1倍体期。S期是正在合成DNA，所以BrdU都是阳性。G2期是已经合成...
13712622600：流式细胞仪检测细胞凋亡,单染可以检测出细胞凋亡率吗?
于施威用PI单染就可以，PI是用来测细胞周期的，在单倍体峰前如果有个亚峰则表明有凋亡，但是这个方法不是很好，坏死细胞也会包含在内。准确地说用PI单染测出的凋亡率应该是死亡细胞占细胞总数的比例。建议用AnexinV和PI双染，PI阴性和AnexinV阳性区是真正凋亡的细胞。细胞早期凋亡时，内膜外翻，位于胞浆的...
13712622600：流式细胞仪测细胞周期图怎样分析
于施威胰酶消化并离心收集细胞（800rpm\/min），弃上清，用预冷PBS洗细胞两次，加入预冷70％乙醇， -20℃固定保存。（3） 细胞染色 离心收集细胞（800rpm\/min），以1mL的PBS洗细胞一次，加入500uLPBS含50ug\/mL溴化乙锭（PI），100ug\/mL RNase A, 4℃避光孵育20分钟。（4）检测 以标准程序用流式细胞仪...
实验原理：流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中，在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出，形成细胞柱。通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测，得到该细胞的光散射和荧光指标，分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。
细胞内的DNA含量随细胞周期进程发生周期性变化，如G0/G1期的DNA含量为2C，而G2期的DNA含量是4C。利用PI标记的方法，通过流式细胞仪对细胞内DNA的相对含量进行测定，可分析细胞周期各时相的百分比。
流式pi单染检测细胞周期为什么用乙醇固定细胞
测细胞周期就可以用PI单独染色，也可以用PI加上BrdU/EdU。不论何种方法，都需要固定细胞。使用BrdU还要做细胞膜和核膜的通透，以利于抗体的进入。
一般常见的，只用PI染色的方法，都是使用酒精固定。优点是快速。而BrdU的方法则可以使用多聚福尔马林。测细胞周期就可以用PI单独染色，也可以用PI加上BrdU/EdU。不论何种方法，都需要固定细胞。使用BrdU还要做细胞膜和核膜的通透，以利于抗体的进入。 一般常见的，只用PI染色的方法，都是使用酒精固定。
第二类另外加了一个步骤，在细胞培养液中加入核苷酸的模拟物，比如BrdU或者EdU。细胞新合成的DNA上就会有这些物质。在不同时间点收集细胞，用DNA染料染DNA的同时，还以用抗体或者化学发光法染核苷酸模拟物也发荧光。这个方法的有点就是不仅可以像第一类方法一样，看到处于细胞周期各个期的百分率，另外还可以看到有多少DNA是新合成的。是一个动态的过程。
流式检测细胞周期都有哪些染色方法视频
相关评论：
于施威从分类上来说，一般有两类：第一类是只染DNA。这类方法比较简单，用酒精固定细胞后，直接加含有RNA酶的荧光染料，比如PI等，然后就可以直接上机。第二类另外加了一个步骤，在细胞培养液中加入核苷酸的模拟物，比如BrdU或者EdU。细胞新合成的DNA上就会有这些物质。在不同时间点收集细胞，用DNA染料染DNA的...
于施威这是因为做细胞周期的时候要用荧光染料染DNA，一次判断细胞DNA的相对含量。这些荧光染料，比如PI，可以染核酸，无法特异性的分别DNA和RNA。只有用RNA酶消化掉RNA后，才能消除RNA的干扰。不然DNA和RNA都会被染色。
于施威测细胞周期就可以用PI单独染色，也可以用PI加上BrdU\/EdU。不论何种方法，都需要固定细胞。使用BrdU还要做细胞膜和核膜的通透，以利于抗体的进入。一般常见的，只用PI染色的方法，都是使用酒精固定。优点是快速。而BrdU的方法则可以使用多聚福尔马林。
于施威这个是BrdU和7-AAD方法检测细胞周期。红色的gate就是G1期，绿色的就是S期，橙色的就是G2\/M期。BrdU, PI, 或者EdU方法和这个一样分析 如果单用PI等DNA染料染色，需要专业软件来分析计算了。比如这个图，是DNA染料单染，其中粉色部分是G1期，黄色部分是S期，绿色部分是G2\/M期。中间的分布一般是通过...
于施威细胞内部钙离子浓度，直接加钙离子浓度荧光染料染色；细胞内部线粒体膜电位，比如JC-1，罗丹明染料；使用微球阵列，可以同时检测溶液中数十种可溶性蛋白的浓度。流式细胞仪的科研应用：主要有细胞动力学功能研究、环境微生物分析、流式细胞术与分子生物学研究。流式细胞仪检测方法 1、直接免疫荧光标记法 取...
于施威得到该细胞的光散射和荧光指标，分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。细胞内的DNA含量随细胞周期进程发生周期性变化，如G0\/G1期的DNA含量为2C，而G2期的DNA含量是4C。利用PI标记的方法，通过流式细胞仪对细胞内DNA的相对含量进行测定，可分析细胞周期各时相的百分比。
于施威如果只是PI的话，见图1。如果用Annexin V-FITC和碘化丙啶染色的话，正常的活细胞不被Annexin V-FITC和碘化丙啶染色(图2左下角)；凋亡早期的细胞仅被Annexin V-FITC染色，碘化丙啶染色呈阴性(图2右下角)；坏死细胞和凋亡晚期的细胞可以同时被Annexin V-FITC和碘化丙啶染色(图2右上角)。
于施威再加入PI对DNA染色。在二维坐标图上，横坐标设为线性PI荧光强度，纵坐标设为模拟核苷酸的荧光强度（log）。典型的图就像下面一样：G1, G2 和S期就按照图中的划分来做。G1期的细胞没有新合成DNA，所以BrdU信号是阴性，而PI的信号位于1倍体期。S期是正在合成DNA，所以BrdU都是阳性。G2期是已经合成...
于施威用PI单染就可以，PI是用来测细胞周期的，在单倍体峰前如果有个亚峰则表明有凋亡，但是这个方法不是很好，坏死细胞也会包含在内。准确地说用PI单染测出的凋亡率应该是死亡细胞占细胞总数的比例。建议用AnexinV和PI双染，PI阴性和AnexinV阳性区是真正凋亡的细胞。细胞早期凋亡时，内膜外翻，位于胞浆的...
于施威胰酶消化并离心收集细胞（800rpm\/min），弃上清，用预冷PBS洗细胞两次，加入预冷70％乙醇， -20℃固定保存。（3） 细胞染色 离心收集细胞（800rpm\/min），以1mL的PBS洗细胞一次，加入500uLPBS含50ug\/mL溴化乙锭（PI），100ug\/mL RNase A, 4℃避光孵育20分钟。（4）检测 以标准程序用流式细胞仪...
