流式细胞仪检测细胞凋亡,单染可以检测出细胞凋亡率吗?

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PI染色流式细胞仪结果图分析,只是看细胞凋亡,多谢~

这个实验有几个问题:
在FSC SSC这个图上没有看到明显的细胞群,有可能是PMT电压没有设置好,或者是细胞因为处理的太过,都死了,成为碎片。
第二个图的PI染色,既然你说是要做凋亡检测,目前PI单染看凋亡,只有是测sub G1期。这个横坐标应该设为线性而不是对数。
所以说你整个实验都设置错了。只有重做了。

FITC代表的是annexin V 染色, 代表早期凋亡,PI 单染,代表死亡的细胞,双染阳性的是正在凋亡的细胞.
所以,Q2+ Q4就是所有凋亡的细胞

用PI单染就可以,PI是用来测细胞周期的,在单倍体峰前如果有个亚峰则表明有凋亡,但是这个方法不是很好,坏死细胞也会包含在内。准确地说用PI单染测出的凋亡率应该是死亡细胞占细胞总数的比例。建议用AnexinV和PI双染,PI阴性和AnexinV阳性区是真正凋亡的细胞。细胞早期凋亡时,内膜外翻,位于胞浆的磷脂酰丝氨酸转位至细胞表面,FITC标记的Anexin V能与其结合,而坏死细胞不具有该特点。


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相关评论:
  • 19884045869流式细胞仪检测细胞凋亡,单染可以检测出细胞凋亡率吗?
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  • 19884045869流式细胞测凋亡率.数据中哪个代表凋亡率
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    沈雨玉流式图四个象限看凋亡:在二维散点图上,PI 和 annexin V 分别是X和Y轴。一般认为PI单染的细胞是已经死亡的细胞,annexin V 单染的细胞是凋亡早期的细胞,而双染是凋亡中期的。需要在散点图上先画出4个象限,位置根据无染色的阴性细胞先定出左下象限。Annexin V是一种检测细胞凋亡的试剂,在正常...

  • 19884045869做流式细胞周期和凋亡检测多少钱?
    沈雨玉试剂盒不贵,流式细胞周期用PI单染,假如自己实验室有流式细胞仪的话,试剂不贵,不过如果别的实验室的话,大概要100-200块一个样品,凋亡检测价格也差不多就这个价钱

  • 19884045869请问流式细胞仪检测细胞凋亡的原理是什么?
    沈雨玉因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素(EGFP、FITC)标记,以标记了的Annexin V作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过...

  • 19884045869PI染色流式细胞仪结果图分析,只是看细胞凋亡,多谢
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    沈雨玉二维点图以双参数显示结果,每个点表示一个或多个细胞。图5-6为阴性对照图,用于设定阴性对照边界,全图划分为四个象限,以区分阴性细胞、单阳性细胞以及双阳性细胞。左下象限(LL)为双阴性细胞,左上象限(UL)为Y轴阳性细胞(CD19 PE),左下象限(LR)为X轴阳性细胞(CD3 FITC),右上象限(UR...

  • 19884045869流式细胞仪 FITC-PI双染HEK293T细胞 空白组细胞凋亡率很高
    沈雨玉PI的染色看起来很弱 第三,Annexin V单染没有强阳性,而且这个细胞群都有右移,这个提示很可能是你处理细胞过头导致的假阳性。第四,你没有贴FSC-SSC的图。真有凋亡发生,那个图也会有变化的。第五,你的单染对照因为设置的电压过低,没有做对双色补偿,所以你这个实验数据时无效的。

  • 19884045869Flowjo处理凋亡结果
    沈雨玉凋亡blank不是最好的阴性对照,应该是用IGg同型对照最好,所以圈门可以根据单染FITC和PI来看结果。FITC标记的 Annexin V 染色先于细胞凋亡或细胞坏死过程中伴随产生的细胞膜完整性丧失的出现。因此,利用FITC标记的Annexin V染色时通常结合活体染料如碘化丙啶(PI)或7-Amino-Actinomycin(7-AAD),方便...

  • 19884045869检测细胞凋亡AV-PI双染 的时候单染做对照的细胞用的是空白组的细胞吗...
    沈雨玉是的,用未加药物处理的细胞单染,调出补偿电压

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