重组人生长激素测定方法

测定重组人生长激素的方法采用高效液相色谱法结合分子排阻色谱技术。此方法主要针对的是重组人生长激素的含量测定，适用于该类产品的质量控制。

其基本原理是将供试品制成磷酸盐缓冲液（pH值为7.0）溶液，然后通过高效液相色谱仪进行色谱分离，利用紫外吸收检测器，在214nm波长下测量其吸光度，从而计算出重组人生长激素的含量。实验过程中，所需试剂包括异丙醇和磷酸盐缓冲液，仪器设备则包括高效液相色谱仪、色谱柱（适合球状蛋白，分子量在5000-60000之间，填充物为亲水硅胶）以及紫外吸收检测器。

色谱条件设定如下：流动相为异丙醇和磷酸缓冲液的混合物（3:97比例），检测波长为214nm，柱温保持在室温，流速为0.6mL/min。试样制备步骤包括配置磷酸盐缓冲液，精确称取供试品，以及对照品和供试品溶液的制备。对照品溶液需精确配制每1mL含有1.0mg的重组人生长激素单体与二聚体混合物，供试品溶液则需溶解并稀释至相同浓度。

操作时，需分别吸取20μL对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪，通过紫外吸收检测，测定单体与二聚体的吸光度，以此计算生长激素的含量。详细操作步骤请参考《中华人民共和国药典》（2005年版，二部，p.413）。

重组人生长激素，是由191个氨基酸残基或N端有一甲硫氨酸的192个氨基酸残基组成的蛋白，可加适量赋形剂或稳定剂。含重组人生长激素量应为标示量的90.0%～110.0%。本药品有调整内分泌系统、激活并维护免疫系统的正常工作等作用。