过氧化氢酶探究pH值对酶活性的影响实验步骤

用过氧化氢酶探究pH值对酶活性的影响实验步骤[详细]要考了，急！！！！！~

实验原理 新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶,在适宜的条件下可以催化过氧化氢分解成水和氧.将点燃的卫生香放入反应试管内液面的上方,卫生香燃烧会更猛烈.实验目的 学会探索影响酶活性条件的方法.探索过氧化氢酶在不同pH下催化过氧化氢水解的情况,领会影响酶活性的主要条件.材料用具 新鲜的质量分数为20％的肝脏（如猪肝、鸡肝）研磨液,体积分数为3％的过氧化氢溶液.质量分数为5％的HCl溶液,质量分数为5％的NaOH溶液,蒸馏水.试管,量筒,滴管,试管架,酒精灯,pH试纸,卫生香,火柴.确定变量 自变量为3组不同pH条件（中性为蒸馏水、碱性为质量分数为5％的NaOH溶液、酸性为质量分数为5％的HCl溶液）.确保单一自变量,其它条件或因素都保持相同.因变量为气泡（氧气）的产量.设计思路 过氧化氢酶来自新鲜的动物肝脏,材料易得,制备方便.在一般的室温条件下,过氧化氢酶即可催化过氧化氢发生反应,可以不用水浴加热,操作简便.检测实验结果用点燃的卫生香而不用试剂,可减少因与试剂自身相关的无关变量对实验结果的影响.本实验仍设置3组不同pH条件下的反应装置进行对照实验.方法步骤、预期结果及结论 （见表3）表3 重新设计的方法步骤、预期结果及结论序号内容试管1试管2试管31注入等量的新鲜肝脏研磨液1mL1mL1mL2注入等量的不同pH值的溶液1mL蒸馏水1mLNaOH溶液1mLHCl溶液3注入等量的过氧化氢溶液2mL2mL2mL4预期实验结果气泡较多气泡较少或没有气泡较少或没有5将点燃的卫生香插入试管内液面的上方燃烧猛烈燃烧较弱燃烧较弱6结论酶催化反应需要适宜的pH。

详细步骤太麻烦了。告诉你思想吧。
设置3-7个PH梯度，从酸到碱（即HCL和NAOH，或调配缓冲液也行）（最好酸碱的数量相等，一定要有中性（即蒸馏水））。分别加入过氧化氢酶、邻甲氧基苯酚（全等量），再设置一管不加酶的对照管。加入双氧水。用分光光度计测吧。

①实验目的是探究pH对过氧化氢酶活性的影响，故先在1号、2号、3号试管中各加入2mL新配制的体积分数为3%的过氧化氢溶液，再向l号试管内加入l mL蒸馏水，向2号试管内加入1mL（等量）氢氧化钠溶液，向3号试管内加入1mL（等量）盐酸溶液，并振荡试管。

②据题分析可知，向1号、2号、3号试管内各滴入2滴鸡肝研磨液。

③气泡的多少反应了过氧化氢酶活性的高低。仔细观察各试管内产生气泡的多少，并记录。

在最适pH时，酶的活性最高；当高于或低于最适pH时，酶的活性都会降低．故实验结果为：1号试管内产生的气泡较多；2号和3号试管内产生的气泡较少。

除pH外，还有其它环境因素会影响过氧化氢酶的活性，就此提出相关研究课题：探究温度对过氧化氢酶活性的影响。
故答案为：

①1mL（等量）氢氧化钠溶液（试剂量和试剂名缺一不给分） 1mL（等量）盐酸溶液（试剂量和试剂名缺一不给分）。

②鸡肝研磨液

③产生气泡较多

探究温度对过氧化氢酶活性的影响（或其他合理答案）
点评：本题考查影响酶活性的因素及探究实验，重点是考查影响酶活性的探究实验，要求学生掌握实验设计的原则，准确判断实验的自变量、因变量和无关变量。

同时要掌握影响酶促反应速率的因素。酶作为生物催化剂，不仅具有一般无机催化剂的特点，还具有专一性、高效性和温和性等特点，所有这些内容都是生物实验的好素材．以酶的特性为知识背景，可以较好的测试学生的实验知识及操作能力。

扩展资料：

动力学方法

测定一定时间内所起的化学反应量。

①比色法 如果酶反应的产物可与特定的化学试剂反应而生成稳定的有色溶液，且生成颜色的深浅与产物的浓度在一定的范围内有线性关系可用此法。

如蛋白酶的活力测定：蛋白酶可水解酪蛋白，产生的酪氨酸可与福林试剂反应生成稳定的蓝色化合物，在一定的浓度范围内，所生成蓝色化合物颜色的深浅与酪氨酸的量之间有线性关系，可用于定量测定。

②量气法 主要用于有气体产生的酶促反应。如氨基酸脱羧酶、脲酶的活力测定。产生的二氧化碳量可用特制的仪器如瓦氏呼吸仪测定之。根据气体变化和时间的关系，即可求得酶反应的速度。

③滴定法 如果产物之一是自由的酸性物质可用此法。如脂肪酶催化脂肪水解，脂肪酸的增加量代表脂肪酶的活力。

④分光光度法 利用底物和产物光吸收性质的不同，可直接测定反应混合物中底物的减少量或产物的增加量。几乎所有的氧化还原酶都使用该法测定。

如还原型辅酶Ⅰ(NADH2)和辅酶Ⅱ(NADPH2)在340nm有吸收，而NAD和NADP在该波长下无吸收，脱氢酶类可用该法测定。该法测定迅速简便，自动扫描分光光度计的使用对酶活力的快速准确的测定提供的极大的方便。

参考资料来源：百度百科-酶活性

实验原理 新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶,在适宜的条件下可以催化过氧化氢分解成水和氧.将点燃的卫生香放入反应试管内液面的上方,卫生香燃烧会更猛烈.实验目的 学会探索影响酶活性条件的方法.探索过氧化氢酶在不同pH下催化过氧化氢水解的情况,领会影响酶活性的主要条件.材料用具 新鲜的质量分数为20％的肝脏（如猪肝、鸡肝）研磨液,体积分数为3％的过氧化氢溶液.质量分数为5％的HCl溶液,质量分数为5％的NaOH溶液,蒸馏水.试管,量筒,滴管,试管架,酒精灯,pH试纸,卫生香,火柴.确定变量 自变量为3组不同pH条件（中性为蒸馏水、碱性为质量分数为5％的NaOH溶液、酸性为质量分数为5％的HCl溶液）.确保单一自变量,其它条件或因素都保持相同.因变量为气泡（氧气）的产量.设计思路 过氧化氢酶来自新鲜的动物肝脏,材料易得,制备方便.在一般的室温条件下,过氧化氢酶即可催化过氧化氢发生反应,可以不用水浴加热,操作简便.检测实验结果用点燃的卫生香而不用试剂,可减少因与试剂自身相关的无关变量对实验结果的影响.本实验仍设置3组不同pH条件下的反应装置进行对照实验.方法步骤、预期结果及结论 （见表3）表3 重新设计的方法步骤、预期结果及结论序号内容试管1试管2试管31注入等量的新鲜肝脏研磨液1mL1mL1mL2注入等量的不同pH值的溶液1mL蒸馏水1mLNaOH溶液1mLHCl溶液3注入等量的过氧化氢溶液2mL2mL2mL4预期实验结果气泡较多气泡较少或没有气泡较少或没有5将点燃的卫生香插入试管内液面的上方燃烧猛烈燃烧较弱燃烧较弱6结论酶催化反应需要适宜的pH。

正确步骤应该2-1-3-4。
过氧化氢溶液是底物，也就是反应物，不先加反应物，怎么进行反应呢？所以2是第一个步骤。然后加酶（猪肝），因为探究的是pH值对酶活性的影响，所以同样的，不加酶怎么进行探究呢？所以1是第二个步骤。接下来就应该进行探究了，三个试管里依次加入盐酸、NAOH、蒸馏水，分别探究过酸过碱对酶活性的影响，加蒸馏水对照，可以通过试管里冒出气泡的速度进行探究（过氧化氢分解生成氧气）。所以3是第三个步骤。观察现象是第四个步骤。

该实验的目的是探究过氧化氢酶的活性是否受pH影响．实验设计应该遵循对照原则和单一变量原则，该实验的自变量是pH，因变量是过氧化氢酶的活性，其他都是无关变量．影响酶活性的因素主要有温度和pH，低温能使酶的活性降低，但不会使酶失活，而高温、过酸和过碱都会使酶失活．
解答： 解：（1）①实验目的是探究pH对过氧化氢酶活性的影响，故先在1号、2号、3号试管中各加入2mL新配制的体积分数为3%的过氧化氢溶液，再向l号试管内加入l mL蒸馏水，向2号试管内加入1mL（等量）氢氧化钠溶液，向3号试管内加入1mL（等量）盐酸溶液，并振荡试管．②据题分析可知，向1号、2号、3号试管内各滴入2滴鸡肝研磨液．③气泡的多少反应了过氧化氢酶活性的高低．仔细观察各试管内产生气泡的多少，并记录．
（2）在最适pH时，酶的活性最高；当高于或低于最适pH时，酶的活性都会降低．故实验结果为：1号试管内产生的气泡较多；2号和3号试管内产生的气泡较少．
（4）除pH外，还有其它环境因素会影响过氧化氢酶的活性，就此提出相关研究课题：探究温度对过氧化氢酶活性的影响．
故答案为：
（1）①1mL（等量）氢氧化钠溶液（试剂量和试剂名缺一不给分） 1mL（等量）盐酸溶液（试剂量和试剂名缺一不给分）
②鸡肝研磨液
③产生气泡的多少
（2）较多 较少
（4）探究温度对过氧化氢酶活性的影响（或其他合理答案）
点评：本题考查影响酶活性的因素及探究实验，重点是考查影响酶活性的探究实验，要求学生掌握实验设计的原则，准确判断实验的自变量、因变量和无关变量，同时要掌握影响酶促反应速率的因素．酶作为生物催化剂，不仅具有一般无机催化剂的特点，还具有专一性、高效性和温和性等特点，所有这些内容都是生物实验的好素材．以酶的特性为知识背景，可以较好的测试学生的实验知识及操作能力．

今天我们刚上 老师说应该先处理酶，因为过氧化氢与酶的反应很快很剧烈 少许酶都能有明显现象，所以应该先加入酶

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