求细胞周期检测方法：PI法操作步骤
不管看哪个图，只要是加药处理组和对照组之间相比较S期减少了，就可以说明阻滞了其增值，但是想要看阻滞在周期中的哪个环节就要分析一下对应比例的上调和下调。还有就是一定要记得同步化。
1. 细胞培养：取对数生长期的细胞，按1×106cells/ mL以1mL接种24孔板或2mL接种于6孔板内，进行所需的处理（比如加入药物），特定时间后终止培养，进行下一步的实验。
2. 细胞固定： 800rpm离心5min，收集细胞沉淀，弃上清，用预冷PBS洗涤两次，加入预冷75%乙醇，于4℃固定4h以上。
3. 细胞染色：1500rpm离心5min，弃上清，以3mL的PBS洗涤一次，加入400uL溴化乙锭（PI，50ug/mL），100ul RNase A（100ug/mL ），4℃避光孵育30min。
4. 流式分析： 以标准程序用流式细胞仪检测，一般计数2~3万个细胞，结果用细胞周期拟和软件ModFit分析。
细胞周期是指能持续分裂的真核细胞从一次有丝分裂结束后生长，再到下一次分裂结束的循环过程。细胞周期的长短反映了细胞所处状态，这是一个细胞物质积累与细胞分裂的循环过程。癌变的细胞以及特定阶段的胚胎细胞常常有异常的分裂周期。
1. 细胞培养：取对数生长期的细胞，按1×106cells/ mL以1mL接种24孔板或2mL接种于6孔板内，进行所需的处理（比如加入药物），特定时间后终止培养，进行下一步的实验。
2. 细胞固定： 800rpm离心5min，收集细胞沉淀，弃上清，用预冷PBS洗涤两次，加入预冷75%乙醇，于4℃固定4h以上。
3. 细胞染色：1500rpm离心5min，弃上清，以3mL的PBS洗涤一次，加入400uL溴化乙锭（PI，50ug/mL），100ul RNase A（100ug/mL ），4℃避光孵育30min。
4. 流式分析： 以标准程序用流式细胞仪检测，一般计数2~3万个细胞，结果用细胞周期拟和软件ModFit分析。
1、 0.25%胰酶（无EDTA）消化，将细胞消化成单个。（必须消化成单个）。2、离心收集细胞，弃上清，用预冷PBS洗细胞两次（加3ml，吹悬，离心，弃上清算洗一次）。3、加入3ml预冷（-20度）70%乙醇到细胞沉淀中，于4度固定过夜（或者，如果实验周期长可以-20℃长期固定）。4、离心收集细胞，以3mL的PBS洗细胞两次，加入500uLPBS含50ug/mL溴化乙锭（PI），100ug/mL RNase A， 0.2% Triton X-100， 4℃避光孵育30分钟（PI我是直接用PBS配成工作浓度，然后加入细胞沉淀混匀，RNA酶现加，但有时不加发现对实验结果也没太大的影响）。5、送6楼中心实验室，上机
1、 0.25%胰酶（无EDTA）消化，将细胞消化成单个。（必须消化成单个）。
2、离心收集细胞，弃上清，用预冷PBS洗细胞两次（加3ml，吹悬，离心，弃上清算洗一次）。
3、加入3ml预冷（-20度）70%乙醇到细胞沉淀中，于4度固定过夜（或者，如果实验周期长可以-20℃长期固定）。
4、离心收集细胞，以3mL的PBS洗细胞两次，加入500uLPBS含50ug/mL溴化乙锭（PI），100ug/mL RNase A， 0.2% Triton X-100， 4℃避光孵育30分钟。
5、送实验室，上机
求细胞周期检测方法：PI法操作步骤视频
相关评论：
柳斧馨2、离心收集细胞，弃上清，用预冷PBS洗细胞两次（加3ml，吹悬，离心，弃上清算洗一次）。3、加入3ml预冷（-20度）70%乙醇到细胞沉淀中，于4度固定过夜（或者，如果实验周期长可以-20℃长期固定）。4、离心收集细胞，以3mL的PBS洗细胞两次，加入500uLPBS含50ug\/mL溴化乙锭（PI），100ug\/mL RNase ...
柳斧馨监测细胞增殖活性时，BrdU法、MTT法和BrdU\/PI法都是不错的选择；区分G1\/S期和G2\/M期可采用Cyclins\/PI法；同时检测细胞周期与凋亡，可采用TUNEL\/PI染色和F-Actin\/PI染色。总之，正确选择和应用细胞周期及细胞增殖检测方法，能够为科研工作提供准确、可靠的数据支持，推动生物医学研究的深入发展。
柳斧馨细胞周期是一个细胞从有丝分裂起始到结束的关键过程，包括G0\/G1期、S期、G2期和M期。FlowJo作为一种常用的工具，能通过核酸染料PI标记和流式细胞仪分析，帮助我们详细观察细胞周期分布。其核心原理是PI染料与DNA结合的比例与其含量成正比，从而区分细胞各时期的丰度。以下是使用FlowJo进行细胞周期分析的...
柳斧馨这个是BrdU和7-AAD方法检测细胞周期。红色的gate就是G1期，绿色的就是S期，橙色的就是G2\/M期。BrdU, PI, 或者EdU方法和这个一样分析 如果单用PI等DNA染料染色，需要专业软件来分析计算了。比如这个图，是DNA染料单染，其中粉色部分是G1期，黄色部分是S期，绿色部分是G2\/M期。中间的分布一般是通过...
柳斧馨采用PI染色法,以流式细胞术通过检测DNA含量分析细胞凋亡,比较ModFit LT及CELLQuest软件的分析数据.结果显示:ModFit LT与CELLQuest软件均可分析细胞凋亡,ModFit LT软件更客观、准确.我们建议使用ModFit LT软件进行细胞凋亡相对定量分析,CELLQuest软件只用于细胞凋亡的定性分析.
柳斧馨第二类另外加了一个步骤，在细胞培养液中加入核苷酸的模拟物，比如BrdU或者EdU。细胞新合成的DNA上就会有这些物质。在不同时间点收集细胞，用DNA染料染DNA的同时，还以用抗体或者化学发光法染核苷酸模拟物也发荧光。这个方法的有点就是不仅可以像第一类方法一样，看到处于细胞周期各个期的百分率，另外还...
柳斧馨膜片钳技术: 这一技术用于研究离子通道，通过封接细胞膜并监测离子电流，是研究领域的黄金标准。细胞迁移与侵袭: Transwell实验测定细胞迁移和侵袭能力，如肿瘤细胞在特定条件下向营养丰富的区域移动。细胞周期检测: 通过PI染色法结合流式细胞术，区分细胞周期各阶段，评估细胞增殖速度。细胞克隆实验: 评估细胞...
柳斧馨首先，你需要确定你想观察细胞的什么东西。你只想把细胞染亮的话，用calciem AM，染核的话用DAPI或者hoescht33342，染死细胞核的话用PI，染线粒体，内质网，endosome，actin等都有自己的染料。 然后，你根据不同的染料的说明配制溶液，养细胞，...
柳斧馨细胞划痕实验细胞划痕实验通过模拟细胞损伤后修复的过程，评估细胞迁移与修复能力，常用于研究细胞运动特性。细胞周期检测细胞周期反映细胞增殖速度，采用流式细胞术结合PI染色法检测群体细胞周期，通过DNA含量差异区分各时相，进一步计算各阶段细胞比例，为细胞动力学研究提供重要依据。细胞粘附实验细胞粘附性是细胞...
柳斧馨3. 数据分析：根据观察到的荧光信号，进行数据分析，如细胞凋亡率等。四、注意事项 1. 在操作过程中，要确保细胞涂片的均匀性，避免染色不均。2. PI染色液要现配现用，避免长时间存放。3. 操作过程中要轻柔，避免细胞损失。PI染色是一种常用的细胞核染色技术，主要用于细胞凋亡和细胞周期的研究。通过...
