硅胶层析硅胶柱层析技术

硅胶层析是一种基于物质在硅胶上吸附力差异进行分离的技术。其基本原理是，极性较强的化合物倾向于被硅胶吸附，极性较弱的则不易被吸附，这个过程包括吸附、解吸、再吸附和再解吸的循环。

流动相的选择根据物质的极性来定：极性小的使用乙酸乙酯和石油醚洗脱；极性大的则用甲醇、氯仿或甲醇、水、正丁醇和醋酸。在拖尾过程中，有时会加入氨水或冰醋酸以改善分离效果。

进行硅胶柱层析时，首先需要精确称量硅胶，通常为样品量的30-70倍，甚至100倍，视具体情况而定。溶剂应是干的，如果遇到问题，可能需要预处理以去除水分。装柱时，要确保柱底密封，然后逐步加入石油醚或氯仿，通过加压压实柱床，以提高分离度和柱的稳定性。

上样时，可以采用干法或湿法，无需海沙。上样后，加入适量洗脱剂并放置脱脂棉，然后逐渐加入大量洗脱剂。过柱时采用梯度洗脱，以实现更有效的分离。收集阶段，根据样品量和硅胶类型设定适当的收集体积，如10mg上样量对应0.5ml一馏分。

检测阶段，推荐使用专用喷显剂而非仅依赖紫外灯，以提高灵敏度和减少产品损失。在送谱前，可能需要重结晶处理，或通过小凝胶柱进行最后的纯化，以移除可能存在的“硅胶”峰。

硅胶层析是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使物质分离， 一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。硅胶层析主要用于石油产品的精制，脱除芳烃物质或用于中草药有效成分的分离提纯，高纯度物质的制备等。