植物组织培养过程中的污染控制措施有哪些?

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~ 植物组织培养过程中的污染控制措施主要包括以下几个方面:
1. 彻底的灭菌处理:对于培养基、培养皿、镊子、解剖刀、去离子水和滤纸等必须进行彻底的灭菌处理。通常,培养基、镊子、解剖刀、去离子水等采用121℃ 20-30分钟的湿热灭菌法,玻璃器皿则使用180℃ 2小时的干热灭菌法,而抗生素、激素等不耐高温的试剂则通过过滤灭菌法处理。
2. 细致的消毒步骤:外植体和操作台面的消毒是必不可少的,目的是在不伤害植物的同时,尽可能地抑制和杀死微生物。外植体的消毒通常分为表面消毒和侵入消毒。操作台面的消毒可以通过30分钟紫外线灯照射,或在操作过程中使用空气滤过装置。此外,使用70%酒精擦拭台面也能有效消毒。
3. 严格的无菌操作规范:操作过程中必须避免任何可能的污染源。具体措施包括:在独立的组培室内进行操作,并通过缓冲间进入;进入组培室前进行全身酒精喷雾消毒,并更换专用的拖鞋;操作时避免手臂穿越开口器皿;保持超净台整洁,避免器皿遮挡出风口;在超净台附近点燃酒精灯,尽量在火焰周围进行操作;及时灼烧灭菌使用的金属工具和玻璃器皿;镊子、枪头等接触培养基的工具在接触其他表面后立即灼烧灭菌或更换;将进行不同实验的超净台分开使用。
通过上述措施,可以最大限度地减少植物组织培养过程中的污染风险,确保实验的顺利进行。


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