DEAE柱层析纯化多糖原理

DEAE-纤维素阴离子柱层析分离多糖的原理是什么？~

DEAE纤维素阴离子柱层板分离多糖的原理主要是其可吸附离子型物质，比如蛋白质、酸性多糖等，而作为大多数的中性多糖则可顺利流出，从而去粗取精、达到分离的目的。当然，DEAE的细度很细，也可起到分子筛的作用，但其分离效果会和柱高、洗脱溶剂、粒径的关系很大，效果并不很好，且在大量水冲的情况下，中性多糖基本均可洗脱下来。

DEAE纤维素柱原理，基于离子交换层析：离子交换层析中，基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。
阴离子交换基质结合，带有负电荷的蛋白质，然后这类蛋白质被留在柱子上，然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施，将吸附在柱子上的蛋白质从而洗脱下来。

扩展资料：
基本信息：
性状：干燥纤维状。
用途：用于柱色谱分析，用以分离提纯多糖、肽、核苷酸、酶、血清组分和病毒等，阴离子交换填料。
保存：常温干燥封袋保存。
DEAE—纤维素的使用方法：
称取IgDEAE32或52，放入5ml量筒中，加蒸馏水浸泡过夜，观察溶胀后DEAE的体积。根据所需层析柱的柱床体积计算所需DEAE的用量，称取所需DEAE用蒸馏水浸泡过夜，其间换几次水，每次除去细小颗粒。
抽干，改用0.5mol/LNaOH溶液浸泡1h以上，抽干（可用布氏漏斗），用无离子水漂洗，使pH至8左右（用pH试纸检查）。再改用0.5mol/LHCl溶液浸泡1h以上，去酸溶液，用无离子水洗至pH6左右。本实验中在用前应以0.0175mol/L，pH6.7磷酸盐缓冲液，浸泡平衡后使用。
参考资料来源：百度百科-DEAE纤维素

DAEA：2-二乙氨基乙醇
在柱层析中DAEA是作为洗脱剂的。由于糖类在水溶液中对有机物吸附能力很强，在有机溶剂中则较弱。所以用水和乙醇的溶液进行梯度洗脱。

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