叙述细菌,放线菌,酵母菌,霉菌的光学显微镜制片方法

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在显微镜下细菌,放线菌,酵母菌,霉菌主要差别是什么~


细菌,放线菌是原核生物类,
酵母菌以及霉菌是真核类,
它们均是进行二分裂生殖
对于应用,细菌多用于制造平时我们食俺制品.
酵母菌最主要是制葡萄酒了

一、细菌制片及简单染色:
1、涂片
取洁净的载玻片1张,将其在火焰上微微加热,除去上面的油脂,冷却,在中央部位滴加一滴无菌水,用接种环在火焰旁从培养基上挑取少量菌体与水混合。用接种环将菌体涂成直径约1cm的均匀薄层。注意,取菌量不宜过大,一面造成军体重叠。
2、干燥
放在桌面上,待其自然干燥。
3、固定
将已干燥的涂片标本向上,在火焰上通过3-4次固定。其目的是杀死细菌;使菌体蛋白质凝固,菌体牢固粘附于载玻片上,染色时不被染液或水冲掉;增加菌体对染料的结合力,使图片易着色。
4、染色
在涂片上滴加染料1-2滴,使其布满涂菌部分,染色1分钟。
5、冲洗
斜置玻片,倾去染液。用水轻轻冲去染液,至流水变清。注意水流不能直接冲洗涂菌处,以免将涂菌冲洗掉。
6、吸干
用吸水纸轻轻吸去玻片上的水分,干燥后镜检。

二、酵母菌制片及简单染色。
水—碘液浸片法。将革兰氏染色用碘液用水稀释4倍后,滴加一滴于载破片中央,无菌操
作取少许菌体置于染色中混匀,盖上破片后镜剑。

三、放线菌制片方法(插片法)
1、在马铃薯浸汁琼脂培养基平板上,划线接入少量放线菌的孢子,在接种线旁倾斜地插入无菌盖玻片,于28-30℃培养。
2、培养3~4天后,菌丝沿着盖玻片向上生长,待菌丝长好后,取出盖玻片放在干净的载玻片上,置于显微镜下观察。

四、霉菌制片法
水浸制片法:
1、在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液或蒸馏水。
2、用解剖针从生长有霉菌的斜面挑取少量带有孢子的霉菌菌丝,用50%的乙醇浸润,再用蒸馏水将浸过的菌丝洗一下,然后放入载玻片上的液滴中,仔细地用解剖针将菌丝分散开来。(也可省略酒精和水浸润,洗涤)
3、注意取菌时,毛霉和根霉用解剖针挑取少量菌丝即可,青霉和黑曲霉和培养基结合紧密,不易挑取,可连培养基一起挑取,再在染液中分离菌丝。青霉和曲霉的培养时间不宜过长,一般为2-2.5天,以免菌丝与培养基不好剥离。
4、盖上盖玻片(勿使产生气泡,且不要再移动盖玻片)。(黑曲霉不易观察到足细胞)
5、镜检:先用低倍镜,必要时转换高倍镜镜检并记录观察结果。


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