生物分子类实验室常用实验技术原理汇总

探索生物分子世界：实验室常用技术揭秘

1. GST Pull-down: 目标蛋白的捕获与验证

通过 GST (Glutathione S-transferase) 诱饵蛋白，精准捕获并验证目标蛋白间的互动，揭示生物学中的动态相互作用。

2. 足印法：DNA-蛋白质结合的深度解析

足印法揭示了DNA与蛋白质的精确结合位置，是理解基因调控机制的重要工具。

3. ChIP技术：动态蛋白质-DNA关系的深入研究

ChIP (Chromatin Immunoprecipitation) 技术揭示了组蛋白修饰和基因表达之间的紧密关联，揭示基因调控的复杂网络。

4. 基因芯片：基因表达的全方位检测

基因芯片如同一张DNA探针阵列，能对大量基因进行一次性的高通量检测，捕捉到基因表达的细微变化。

5. HPLC：高效分离与样品鉴定的利器

高效液相色谱 (HPLC) 是分离和鉴定生物样品中复杂成分的强大工具，确保实验结果的准确性。

6. 酵母双杂交 (Y2H)：筛选外源蛋白的高效手段

Y2H技术通过外源蛋白的表达和筛选，揭示生物分子间的相互作用模式。

7. 噬菌体展示：靶分子的精准寻找

噬菌体展示技术通过展示外源蛋白，帮助科学家找到并与目标分子形成稳定结合。

RNA提取 (Trizol法)：细胞内的遗传信息宝藏

Trizol法通过异硫氰酸胍裂解细胞，巧妙分离出RNA，揭示基因转录的秘密世界。

从RT-PCR到Q-PCR：实时定量的突破

RT-PCR与实时荧光定量PCR (Q-PCR) 精确量化RNA表达，捕捉到基因表达的即时动态。

大肠杆菌感受态细胞：基因操作的桥梁

通过培养、转化和冷冻保存，大肠杆菌感受态细胞成为基因工程中的关键媒介。

碱变性提取质粒DNA：分子生物学基础操作

碱变性提取揭示了染色体DNA与质粒DNA间的差异，是基因操作的核心步骤之一。

基因连接与转化：构建生命蓝图的基石

PCR分离、酶切、连接和宿主细胞转化，构建基因蓝图，展现生命密码的巧妙拼接。

RNA干扰 (RNAi)：基因沉默的秘密武器

RNAi技术通过siRNA沉默特定基因，揭示基因调控的精密调控机制。

从RACE到DD-PCR：基因表达的深度解析

RACE技术结合反转录和PCR，揭示未知mRNA区域；DD-PCR则用于分离组织特异性基因表达差异。

多种生物标记技术：揭示蛋白质与基因的复杂互动

从蛋白质芯片到Southern blot，一系列技术手段揭示生命信号的传递与调控网络。

双向凝胶电泳 (2-DE)：蛋白质多样性的多维度展示

2-DE分离蛋白质按等电点和分子量，揭示蛋白质组的丰富多样性。

寡聚(dT)纤维素柱纯化：mRNA的精致分离

寡聚(dT)纤维素柱层析，通过盐浓度梯度，精确分离mRNA的帽子结构和Poly(A)尾巴。

His-Tag蛋白纯化：高效且精确的蛋白分离

His-Tag结合Ni2+的策略，温和条件和高灵敏度，确保目标蛋白纯化的精准性。

RPA：高灵敏度的mRNA定量新方法

RPA技术优于传统方法，以同位素标记探针实现高精度的mRNA定量分析。

免疫组化与分子标记的比较：揭示遗传标记的演变

• RFLP：早期DNA多态性检测的基石。


• RAPD：随机扩增揭示遗传多样性。


• AFLP：形成指纹图谱，孟德尔遗传的有力工具。


• SSR (微卫星DNA)：重复序列的多态性，遗传标记的新高度。

微卫星DNA与SNP：个体遗传差异的标记

微卫星DNA的多态性，SNP的单核苷酸差异，为我们理解个体遗传差异提供了精确工具。

核糖体谱技术：蛋白质翻译的深度解析

• 通过抑制翻译、RNA酶保护与测序，揭示蛋白质翻译的动态过程。

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